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质疑扬州大学动物科学与技术学院李碧春等发表在中国科学C辑（生命科学）上的一篇论文

　　作者：看不惯

　　方先生: 您好！

　　去年在新语丝上看到“《中国科学》杂志社认定中国石油大学（北京）赵震
一稿两投” (XYS20081229)一文。文中说到：“中国科学杂志社认真进行了复查
并将复查意见反馈给我，体现了中国科学杂志社严于律己的学术态度，值得其他
期刊的认真学习。只有杂志社敢于纠正学术不端行为，我国的学术风气才会根本
好转。《中国科学》不愧为我国的权威杂志，深表敬意！”。 想到最近偶然发
现一篇发表在中国科学 C 辑（生命科学 2008 年 第38 卷 第7 期: 626- 634）
的一篇文章。题目很牛：体内外精原干细胞介导大群生产转基因鸡。看来作者肯
定得到了大群能发绿色荧光的转基因鸡了。下载全文一看，不仅绿色的鸡没有，
许多图片的荧光还黄吧那几的，真是GFP吗？赶紧把全文研究了两遍，越研究来
问题越多。我把发现的疑点归纳如下。新语丝上高手如林，请多多赐教，也请本
文的作者们能站出来澄清。

　　1）本文的实验动物为18-19 周龄健康青年公鸡，作者往睾丸内注射表达绿
色荧光蛋白报告基因的pEGFP-N1质粒，25天后采集精液, 用于检测和人工授精。
那实验鸡在注射时已经性成熟或接近性成熟，睾丸中的生精小管中应该有不同发
育阶段的精细胞，管腔中央有精子。可奇怪的是，本文图1-3给出了睾丸切片，
里面细胞很少，也不见精子或精子细胞，根本就不是性成熟阶段睾丸切片，尤其
是图3，管腔中根本就没几个细胞，这可是正常对照的睾丸组织切片啊？怎么回
事？难道鸡的睾丸结构与哺乳动物完全不同吗？不会吧！

　　2）图1给出转染70 天睾丸组织冰冻切片, ×100；图2给出转染70 天睾丸组
织冰冻切片, ×400。冰冻切片为荧光照片，可不是绿色荧光，而是黄色的，那
是GFP吗？我想是自发荧光或背景荧光吧。搞笑的是，作者给出图3石蜡切片明视
野照片作为对照，为什么不把正常对照冰冻切片的荧光照片作为对照？是不是对
照组也像实验组一样均有绿色荧光信号（背景吧）？

　　3）采用2.5 mL注射器(5 号针头)往公鸡睾丸内直接随机注射质粒能行吗？
不用显微操作？5号针头恐怕比睾丸生精小管粗很多吧，不是有屏障结构吗？奇
怪的是本文简单的随机注射效果好的出奇：“手术后70 天的睾丸冰冻切片观察, 
可见表达荧光的细胞均匀地分布在曲精细管周壁内(图1, 2)”。注意是均匀地分
布，既然是随机注射4-5 个点，能找到一个点有所谓的荧光就不错了，可竟然是
均匀地分布，这靠谱否？

　　4）睾丸内注射后, 不同时期还检测精子表达绿色荧光。“在转染25天时已
有2.2%的精子转染率, 到了70天后转染率达到高峰值19.1%, 并维持一段时间”。
用质粒随机注射就能在精子上看到荧光？精子细胞上的细胞质在精子形成过程中
很多都丢失了，唯独会表达GFP，而且比例还不低呀！不会又是自发荧光吧？作
者又故伎重演，给出明视野照片作为对照，为什么不把正常精子涂片的荧光照片
作为对照？是不是对照组也像实验组一样有绿色荧光啊？当然明视野无论如何也
是看不到荧光的。

　　5）表1给出了术后不同时期精子绿色荧光蛋白表达率(%)。作者似乎先假定
“公鸡的一个生精周期为70天”，然后得到结果：“70~160 天, 精子表达荧光
达到高峰时期。” 公鸡的生精周期到底是多少天，作者既然是禽类育种专家，
不会不知道吧？

　　6）为了显示报道的转基因方法厉害，作者还加入了“2.6 家鸭SSCs 转染
EGFP 基因结果：5 只公鸭, 睾丸内转染EGFP 基因，采集精液，人工授精, 共产
生60 枚种蛋, 孵化雏鸭31 只, 5 月龄时存活31 只, 采集它们的血样, 经PCR 
检测, 54.8%(17/31)的个体携带有EGFP 基因。”这也太容易了吧，是搞转基因
还是过家家？

　　7）还没完。“鸡SSCs 转染人组织激肽释放蛋白酶基因结果：4 只公鸡, 睾
丸内转染重组人组织激肽释放蛋白酶基因(rhK1), 采集精液, 人工授精, 共产生
67 枚种蛋, 孵化小鸡38 只, 5 月龄时存活35 只, 血样PCR检测42.9% (15/35)
的个体携带有人hK1 基因。”我无语。

(XYS20090311)

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