◇◇新语丝(www.xys.org)(xys.dxiong.com)(xys.3322.org)(xys.freedns.us)◇◇ 答复易国华博士 J NIU 看到易国华博士的说明的当下,我特别想写个回复,询问他的解释。既然方博士 和Liu都说了这么多,我只是想说,我经常用3%的(高质量、进口)普通琼脂糖 凝胶分开60bp和33bp的酶切片段,获得后者,用2%普通琼脂糖凝胶和低熔点琼脂 糖(2%或3%)是作不到的。 “易国华试验记录是用普通琼脂糖凝胶跑,再用玻璃奶或是低熔点琼脂糖的方法 回收。”“酶切产物只有40多bp”,如果从普通琼脂糖凝胶得到了片段,柱回收 试剂盒适合100bp以上的片段回收,不能用。用普通的玻璃奶回收差,较好的回 收试剂是Ambion的GlycoBlue共沉淀剂。 另外,插入10肽外源片段即300bp(应该小于500bp)DNA的质粒应该较为稳定, 我们有3000bp DNA的插入质粒也没有总活化不出来的情况。 国内分子生物学实验室一博士 (XYS20031119) ◇◇新语丝(www.xys.org)(xys.dxiong.com)(xys.3322.org)(xys.freedns.us)◇◇